褐藻多糖硫酸酯对TGF-β1诱导HK-2间质转分化过程中Smad2/3、 Smad7表达的影响

摘要

目的 观察褐藻多糖硫酸酯对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞(HK-2)间质转分化过程中细胞信号转导分子(Smad) 2/3和Smad7表达的影响,并探讨其机制.方法 HK-2细胞复苏后用RPMI1640培养基加10％胎牛血清在37℃、5％ CO2培养箱中培养.待细胞贴壁后分为3组,对照组加入等量RPMI1640细胞培养基,诱导组予5 μg/L TGF-β1,药物组予5μg/L TGF-β1+50μg/mL褐藻多糖硫酸酯.采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,免疫细胞化学法检测Smad2/3、Smad7表达,图像分析技术分析Smad2/3、Smad7表达阳性的平均光密度值.结果 培养第3天,对照组HK-2细胞呈铺路石样上皮细胞形态特点;诱导组细胞呈长梭形,类似纤维细胞;药物组细胞以上皮细胞为主,少数细胞呈梭形.与对照组比较,诱导组细胞Smad2/3表达增强,Smad7表达减弱;与诱导组比较,药物组细胞Smad2/3表达减弱,Smad7表达增强.与对照组比较,诱导组细胞Smad2/3阳性细胞平均光密度值显著升高,Smad7阳性细胞平均光密度值显著下降;与诱导组相比较,药物组细胞Smad2/3阳性细胞平均光密度值显著下降,Smad7阳性细胞平均光密度值显著升高(P均＜0.05).结论 褐藻多糖硫酸酯可能通过影响TGF-β1信号转导通路中Smad2/3和Smad7的表达发挥抑制HK-2间质转分化作用.