体外高糖环境对 H9 C2心肌细胞增殖的影响及其机制探讨

摘要

目的：观察体外高糖环境对H9 C2心肌细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。方法将体外培养鼠胚心肌细胞H9C2随机分为四组，1组培养液中加入终浓度为5．5 mmol／L的D-葡萄糖，2组加入终浓度为27．5 mmol／L的甘露醇和5．5 mmol／L的D-葡萄糖，3组加入终浓度为33 mmol／L的D-葡萄糖，4组加入终浓度为2μmol／L的经典瞬时受体蛋白（ TRPC）阻滞剂SKF96365和终浓度为33 mmol／L的D-葡萄糖。分别在培养24、48、72 h时，采用CCK8法测定细胞增殖率，实时定量PCR法测定经典瞬时受体蛋白6（ TRPC6）、活化T细胞核因子3（ NFAT3） mR-NA；72 h时采用Western blotting法检测TRPC6及NFAT3蛋白。结果培养72 h时1、2、3、4组细胞增殖率分别为105．88％±10．01％、98．67％±8．97％、28．55％±6．32％、49．18％±7．14％，3组较1、2组降低（P均＜0．05），4组较3组增高（P＜0．05）；3组TRPC6、NFAT3 mRNA及蛋白相对表达量较1、2组增加（P均＜0．05），4组较3组下降（P均＜0．05）。结论高糖抑制心肌细胞增殖；促进心肌细胞TRPC6表达，导致TRPC通道开放，启动钙调神经素（ CaN）／活化T细胞核因子（ NFAT）通路，可能是其作用机制。