miR-133b 对骨肉瘤细胞 MG-63增殖的抑制作用及其机制

摘要

目的：探讨 miR-133b 是否通过下调 KLF4抑制骨肉瘤细胞系 MG-63的增殖。方法将 MG-63细胞分为对照组、miR-NC 组和 miR-133bmimic 组，对照组不做干预，miR-NC 组转染 miR-NC，miR-133bmimic 组转染 miR-133bmimic。24 h 后，Western blotting 法检测 MG-63细胞中与细胞增殖相关的蛋白 p21、p27、PCNA、Ki-67以及 KLF4的表达，12、24、48 h 后，MTT 法观察细胞增殖活力，利用荧光素酶试验验证 KLF4是 miR-133b 的靶基因；将 MG-63细胞随机分为 miR-133b 组、miR-133b ＋KLF4组、miR-133b ＋空质粒组，分别转染 miR-133bmimic、miR-133bmimic ＋KLF4过表达质粒、miR-133bmimic ＋空质粒。检测 MG-63细胞中 p21、p27、PCNA、Ki-67、KLF4的表达，并观察细胞增殖情况。结果相比于 miR-NC 组，miR-133bmimic 组中，24、48 h MG-63细胞的增殖活力降低（P 均＜0．01）， PCNA、Ki-67、KLF4的表达减少，p21、p27表达增加（P 均＜0．05或＜0．01）。荧光素酶试验结果显示，miR-133b 能够显著降低 KLF4-3′-UTR 质粒的荧光素活性（P ＜0．05）；相比于 miR-133b ＋空质粒组，miR-133＋KLF4组 MG-63细胞中 PCNA、Ki-67表达增加（P 均＜0．05），p21、p27表达减少（P 均＜0．01），细胞增殖率升高（P ＜0．01）。结论miR-133b 通过下调 KLF4表达从而抑制骨肉瘤细胞系 MG-63的增殖。