Notch信号通路在TGF-β1诱导胃癌细胞EMT过程中的作用

摘要

目的 探讨Notch信号通路在TGF-β1诱导胃癌细胞上皮间质转化(EMT)过程中的作用及其对胃癌细胞侵袭能力的影响.方法 选择对数生长期胃癌SGC7901细胞,随机分为空白对照组、阴性对照组、siRNA组.siRNA组、阴性对照组分别予Jagged1 siRNA、阴性对照siRNA转染,空白对照组不予转染.转染48 h,收集3组部分细胞,采用荧光定量PCR法检测E-cadherin、Vimentin、Jagged1 mRNA表达,采用Western blotting法检测E-cadherin、Vimentin、Jagged1、N1ICD蛋白表达.取各组剩余细胞,阴性对照组、siRNA组更换为含10 ng/mL TGF-β1的无血清培养基,空白对照组更换为不含TGF-β1的无血清培养基,培养24 h收集细胞,同法检测上述mRNA和(或)蛋白表达.收集各组转染48 h细胞及转染48 h再诱导24 h细胞,采用Transwell侵袭法检测细胞侵袭能力.结果 与空白对照组、阴性对照组比较,siRNA组转染48 h及转染48 h再诱导24 h E-cadherin mRNA和蛋白表达上调,Vimentin、Jagged1 mRNA和蛋白表达下调,N1ICD蛋白表达下调(P均<0.05),而空白对照组与阴性对照组比较P均>0.05.siRNA组转染48 h及转染48 h再诱导24 h侵袭细胞数低于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05),而空白对照组与阴性对照组比较P均>0.05.结论 Notch信号通路可参与TGF-β1诱导的胃癌细胞EMT过程;抑制Notch信号通路能降低胃癌细胞的侵袭能力.