miR-199对结直肠癌细胞增殖、侵袭的影响及机制

摘要

目的探讨微小RNA-199(miR-199)对结直肠癌细胞增殖、侵袭的影响及其作用机制。方法常规培养人正常结肠上皮细胞系(HCoEpiC细胞)、结直肠癌细胞系(LOVE、SW620、SW480、HT29、DLD-1细胞),用实时定量PCR法检测细胞中miR-199表达。将SW620细胞随机分为miR-199过表达组、阴性对照组及miR-199+转铁蛋白受体1(TFR1)共表达组(miR-199mimics+TFR1组),分别将miR-199mimics、mimic-NC、miR-199mimics+TFR1过表达质粒转染至细胞内;另取部分未转染细胞作为空白对照组。实时荧光定量PCR法检测TFR1 mRNA表达,MTT实验检测细胞增殖能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blotting法检测TFR1蛋白表达,生物学软件TargetScan及双荧光素酶报告基因实验分析miR-199的靶基因。结果人结直肠癌细胞系中miR-199相对表达量均低于人结肠上皮细胞系(P均0.05)。miR-199过表达组TFR1 mRNA和蛋白表达均低于空白对照组、阴性对照组(P均<0.05)。miR-199过表达组A490值低于阴性对照组、空白对照组、miR-199mimics+TFR1组(P均<0.05),侵袭细胞数少于阴性对照组、空白对照组、miR-199mimics+TFR1组(P均<0.05)。结论miR-199可抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭,其机制可能与靶向下调TFR1表达有关。