降解植物甾醇产雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮工程菌株的构建及转化培养基优化

摘要

雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)作为甾体激素药物不可替代的中间体,是多种激素类药物的原材料.在分枝杆菌(Mycobacterium sp.ZFZ)体内过表达3-甾酮-△1脱氢酶(KstD),获得一株ADD生产菌,随后研究了不同培养基组成对该菌株生产ADD的影响.在单因素的基础上,以ADD产量为衡量指标,采用向应面法优化了转化培养基的组成,并建立各影响因素变化的二次回归方程.结果表明,最适宜的转化培养条件为玉米浆23 g/L、葡萄糖9g/L、硝酸钠2.8 g/L、磷酸氢二钾2g/L.此条件下底物甾醇浓度为10 g/L时,ADD的产量可达(4.12±0.18) g/L,ADD产量比出发菌株提高了近18倍.