miR-21对视网膜母细胞瘤细胞增殖的影响及作用机制

摘要

目的 探讨MicroRNA-21(miR-21)对视网膜母细胞瘤(RB)细胞增殖的影响及作用机制.方法 采用Real-time PCR技术检测miR-21在正常视网膜组织和确诊RB组织中的表达情况;然后在转染的基础上运用MTT检查RB细胞存活率、流式细胞仪检测细胞凋亡率.Western blot法检测与细胞凋亡相关蛋白PDCD4、Bax、Bcl-2的表达.结果 与正常视网膜组织miR-21表达(0.703±0.071)相比,RB组织miR-21为高表达(2.214±0.162),差异有统计学意义(P0.05),miR-21 inhibitor组在48 h、72 h、96 h的A值均低于NC组,差异均有统计学意义(均为P<0.01).流式细胞术检测结果 显示:NC组凋亡细胞在总细胞中百分比为(3.045±0.301)％和(4.832±0.493)％,miR-21 inhibitor组凋亡细胞在总细胞中百分比为(2.593±0.257)％和(40.167±4.014)％,miR-21 inhibitor组Weri-Rb-1细胞的凋亡率明显高于miR-21 NC组(P<0.01).Western blot检测结果 显示:NC组PDCD4表达(0.192±0.045)相比miR-21 inhibitor组(0.683±0.091)表达明显减少,NC组Bax的蛋白表达水平(0.143±0.036)相比miR-21 inhibitor组(1.192±0.054)也明显减少,差异均有统计学意义(P<0.01),NC组Bcl-2蛋白表达(0.864±0.038)相比miR-21 inhibitor组(0.257±0.026)明显增多,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-21是RB的促癌基因,miR-21抑制剂可以通过降低miR-21表达抑制肿瘤细胞的增殖、促进细胞凋亡,这一过程与PDCD4、Bax、Bcl-2等凋亡相关蛋白有关.