对虾白斑综合征病毒VP12的原核表达及其与VP24和VP26的相互作用

摘要

根据GenBank上对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白基因VP12 (wsv 432)的序列,设计并合成引物,PCR扩增得到VP12基因,构建重组表达载体pBAD/gⅢ-VP12并转化大肠埃希菌Top 10感受态细胞.基因工程菌株在37℃用L-阿拉伯糖诱导,表达产物经Western blot和SDS-PAGE检测显示有与预期大小19 ku相符合的目的蛋白.以Co2+亲和层析方法,获得纯化VP12蛋白.采用Far-Western blot结合ELISA方法,分析VP12与WSSV结构蛋白的作用.结果表明,VP12与囊膜蛋白VP24、VP26具有相互作用,该研究对于揭示WSSV分子组装机制,阐明其致病机理具有重要意义.