PKC_γ过表达诱导C_3H_(10)T_(1/2)细胞生长失控的初探

摘要

通过ＤＮＡ 重组构建蛋白激酶Ｃγ（ＰＫＣγ） 亚类的重组质粒并经基因转染技术和ＤＮＡ 印迹、蛋白质印迹与ＰＫＣ活性分析， 获得了过表达ＰＫＣγ的Ｃ３ Ｈ１０ Ｔ１／２ 细胞———ＮＣＰ４ ． ＮＣＰ４ 细胞生长速率提高， 流式细胞光度术检测表明， ＮＣＰ４ 细胞Ｇ１ 期百分率下降， Ｓ期和Ｇ２ ＋ Ｍ 期百分率升高， 与对照组细胞相比， 血清依赖性明显下降， 贴壁依赖性降低， 在软琼脂中形成小集落， 出现部分转化表型． 进一步检测， 首次观察到ＮＣＰ４ 细胞中癌基因ｃｓｉｓ 表达明显增强， 这可能是ＮＣＰ４ 细胞血清依赖性下降的分子机理之一． 实验表明， 在正常Ｃ３ Ｈ１０ Ｔ１／２ 细胞中ＰＫＣγ的过表达可直接导致细胞增殖加速并可诱导出现部分转化特征．