苦碟子注射液预处理对急性缺血性脑卒中后脑缺血再灌注损伤血瘀毒损证模型大鼠神经功能及海马神经元的影响研究

摘要

背景 急性缺血性脑卒中(AIS)后脑缺血再灌注损伤血瘀毒损证患者的神经功能损伤具有不可逆的特点,因此探讨苦碟子注射液预处理对其神经功能及海马神经元的影响具有一定价值.目的 分析苦碟子注射液预处理对AIS后脑缺血再灌注损伤血瘀毒损证模型大鼠神经功能及海马神经元的影响.方法 本实验时间为2020年10月至2021年2月.采用随机数字表法将64只SPF级成年雄性Wistar大鼠分为假手术组、模型组和治疗组,每组18只,余10只备用.治疗组构建AIS后脑缺血再灌注损伤血瘀毒损证模型,并进行苦碟子注射液预处理.模型组构建AIS后脑缺血再灌注损伤血瘀毒损证模型,不进行苦碟子注射液预处理.假手术组不构建AIS后脑缺血再灌注损伤血瘀毒损证模型.观察各组大鼠整个实验过程中的症状、体征;分别于造模后1、3、6、24、72 h及7 d选取各组大鼠4只,评估其Zea Longa评分以观察其神经功能缺损情况;分别于造模后1、3、6、24、72 h及7 d选取各组大鼠3只,透射电镜下观察其海马神经元形态及超微结构.结果 症状、体征:假手术组大鼠活动灵活,四肢对称;模型组大鼠随着造模时间的延长,逐渐出现爪甲肿胀,鼠尾黑紫甚至出现断尾,易激惹,活动受限;治疗组大鼠爪甲肿胀及黑尾、断尾程度较模型组减轻,活动轻微受限,四肢稍显不对称.假手术组大鼠Zea Longa评分均为0分.治疗组大鼠造模后24 h、72 h、7 d Zea Longa评分低于模型组(P<0.05).模型组大鼠造模后24 h、72 h、7 d Zea Longa评分高于本组造模后1 h,造模后72 h、7 d Zea Longa评分高于本组造模后3、6 h(P<0.05);治疗组大鼠造模后7 d Zea Longa评分高于本组造模后1 h(P<0.05).海马神经元形态及超微结构:假手术组大鼠海马神经元及细胞器结构完整.模型组大鼠造模后6 h海马神经元体积缩小;造模后24、72 h可见细胞核破碎,细胞器大量减少,线粒体肿胀,高尔基体和粗面内质网囊性扩张、肿胀;造模后7 d可见神经元大量减少,形态不规则,细胞器结构破坏严重,线粒体呈空泡状态.治疗组大鼠造模后6 h海马神经元与模型组相比细胞器增多,细胞器结构轻度改变;造模后72 h可见线粒体肿胀程度减轻,高尔基体、粗面内质网形态较好,空泡减少甚至消失,各细胞器结构状态明显好于同期模型组.结论 苦碟子注射液预处理可以减轻AIS后脑缺血再灌注损伤血瘀毒损证模型大鼠的神经功能缺损情况,抑制大鼠患侧海马神经元形态及超微结构的改变,对脑组织具有一定的保护作用,且在造模后6～72 h的作用最明显.