影响豌豆Rubisco组装的因子及其作用机制

摘要

将新鲜制备的不含Rubisco的豌豆叶片低分子量(LMW)蛋白组分在离体条件下于室温保温48 h后,经ND-PAGE分析发现,ATP和Mg2+是组装的必需条件.随着Mg2+浓度的增加,组装成的Rubisco量逐渐增加,直至其浓度到2.5 mmol/L后达到平衡.K+对组装有抑制作用,抑制程度随着K+浓度增加逐渐增强,当K+浓度为5 mmol/L时组装被抑制56%,当K+浓度达到40 mmol/L时,组装被抑制高达90%以上;但同样浓度的Na+则没有抑制作用.另外,以羟自由基对豌豆LMW蛋白组分中的大亚基进行降解处理,对大亚基专一性降解肽谱与对全酶中的相同,也能产生37 kD的降解肽段.而且,预先经ATP和Mg2+处理的样品,LMW组分中37 kD的大亚基降解条带会消失,而在20～30 kD位置附近产生新的降解条带;而K+预处理同样能够产生20～30 kD大亚基的降解条带,但其37 kD的大亚基降解条带没有消失.这说明K+对组装的抑制作用可能是通过与组装中间体结合后产生不利于组装的构象变化实现的.