高效液相色谱-串联质谱法快速测定吸烟者尿液中8-羟基脱氧鸟苷和8-羟基鸟苷

摘要

在采集的尿液样品中依次加入内标和甲醇(控制样品介质中甲醇的体积分数约为50%),所得混合液经自主设计的样品离心分离和过滤装置处理,采用高效液相色谱-串联质谱法快速测定滤液中8-羟基脱氧鸟苷和8-羟基鸟苷的含量。以Synergi Polar-RP色谱柱为固定相,以不同体积比的10g·L^(-1)乙酸铵溶液和甲醇的混合液为流动相进行梯度洗脱,串联质谱分析中采用电喷雾离子源正离子模式和多反应监测模式。以15 N5-8-羟基脱氧鸟苷为内标。8-羟基脱氧鸟苷和8-羟基鸟苷的线性范围均为0.2~40μg·L^(-1),检出限(3S/N)依次为0.054,0.092μg·L^(-1),测定下限(10S/N)依次为0.18,0.32μg·L^(-1)。以中度吸烟者的尿液样品为基体进行加标回收试验,所得日内回收率、日间回收率分别为92.3%~96.3%,93.4%~96.3%,测定值的日内相对标准偏差(n=7)和日间相对标准偏差(n=7)分别为1.6%~3.0%,2.8%~3.4%。