巨噬细胞主穹窿蛋白通过促进骨髓间充质干细胞成骨分化调控骨再生

摘要

目的:探究骨髓巨噬细胞主穹窿蛋白(MVP)对骨再生修复的影响。方法:在野生型(WT)C57BL/6小鼠和特异性敲除巨噬细胞MVP(CKO)的小鼠中分别构建胫骨骨皮质缺损模型,通过Micro⁃CT扫描与重建技术、苏木素⁃伊红染色观察骨再生情况;体外分离培养WT和CKO小鼠骨髓来源的巨噬细胞,并分别与野生型骨髓间充质干细胞(BMSC)共培养,通过碱性磷酸酶染色、成骨分化标记基因实时荧光定量PCR实验,观察敲除巨噬细胞MVP对共培养体系中的BMSC成骨向分化的调控作用;通过细胞因子芯片实验检测巨噬细胞细胞因子的分泌。结果:骨缺损第14天,Micro⁃CT扫描及重建结果显示CKO小鼠缺损区矿化组织少于WT小鼠(P<0.05);苏木素⁃伊红染色结果显示CKO组小鼠缺损区骨痂面积小于WT小鼠;与CKO组巨噬细胞共培养的BMSC的成骨分化标记基因水平显著低于与WT组巨噬细胞共培养组(P<0.05);敲除MVP的巨噬细胞分泌更多抑制成骨的细胞因子CCL2、CCL4、CXCL10、CCL3、IL⁃7。结论:巨噬细胞MVP可能通过促进BMSC成骨分化进而调控骨再生修复。