他克莫司在治疗重型再生障碍性贫血中的免疫调节作用

摘要

目的探讨他克莫司在治疗重型再生障碍性贫血（SAA）中的免疫调节作用。方法选取2015年6月至2018年1月天津医科大学总医院血液科确诊的初治SAA患者,应用免疫磁珠分选SAA患者外周血CD8+T细胞,MTT法检测其增殖能力。应用全身照射（TBI）及供者淋巴细胞输注（DLI）方法制备SAA小鼠模型,其中未接受预处理的正常对照组10只;仅接受TBI组10只;接受TBI及DLI组15只。应用流式细胞术检测CD8+T细胞内穿孔素、颗粒酶的表达及SAA小鼠模型中外周循环CD4+/CD8+细胞比例。应用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测体外培养CD8+T细胞培养基上清中干扰素γ（IFN-γ）水平。构建SAA小鼠模型研究各组用药后血象恢复情况及生存时间。结果共纳入初治SAA患者16例,其中男10例、女6例,年龄22～49岁（中位年龄35岁）。在IL-2浓度20.0、200.0和2 000.0 U/ml刺激时他克莫司可抑制CD8+T细胞增殖（P＆0.05）。应用他克莫司组SAA患者CD8+T细胞内穿孔素表达低于空白对照组和IL-2组[（2.25±0.76）%、（6.70±0.82）%比（9.10±1.90）%,均P＆0.05)]。应用他克莫司组CD8+T细胞IFN-γ水平低于空白对照组（P＆0.05）。给SAA小鼠用药10 d后,他克莫司组SAA小鼠外周血血红蛋白（Hb）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）计数均高于SAA组（均P＆0.05）。他克莫司组SAA小鼠CD8+T细胞内穿孔素表达低于SAA组[（18.39±6.65）比（29.99±9.83）,P＆0.05)]。SAA组小鼠中位生存时间为18.6 d,90 d存活率为0;他克莫司组SAA小鼠中位生存时间为44.6 d,90 d存活率为80%。他克莫司组SAA小鼠生存时间长于SAA组（P＆0.05）。结论他克莫司对SAA患者免疫状态的调节与环孢素A类似,对CD8+T细胞有免疫抑制作用。