实时荧光RT-PCR定量检测BRMS1基因表达

摘要

目的建立一种实时荧光RT-PCR定量检测乳腺组织中BRMS1mRNA表达水平的方法。方法采明逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增目的基因片段,并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,计算出待测样本中BRMS1mRNA含量,并以BRMS1mRNA与GAPDHmRNA的比值作为BRMS1mRNA的表达水平。结果实时荧光RT-PCR检测BRMS1及GAPDH的线性范围为4×102-4×108拷贝/μl。批内和批间变异系数分别为3.9%-4.6%和4.8%-5.5%。BRMS1mRNA表达范围为0-1.65.结论实时荧光定量检测BRMS1mRNA含量的方法具有较高的灵敏度和较好的重复性。