白术黄芪汤乙酸乙酯提取物对巨噬细胞NLRP3炎症小体的作用研究

摘要

目的:观察白术黄芪汤乙酸乙酯提取物对巨噬细胞NOD样受体-3(NLRP3)炎症小体的影响。方法:用佛波酯(PMA)(10 ng·m L-1)刺激U937细胞48 h,诱导其成为巨噬细胞,观察不同剂量白术黄芪汤乙酸乙酯提取物(0,3.125,6.25,12.5,25,50,100μg·m L-1)对细胞活力的作用,并选择合适的浓度。采用实时荧光定量(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)测定细胞中NLRP3,半胱天冬酶-1(caspase-1)的含量,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β的含量。结果:细胞计数试剂盒(CCK-8)实验表明,当药物浓度低于25μg·m L-1时,对细胞活力没有影响,当药物浓度高于50μg·m L-1时,对细胞活力有抑制作用(P<0.05),选择25μg·m L-1浓度进行后续实验。与空白组相比,LPS组细胞中NLRP3,caspase-1表达明显增加(P<0.01),细胞培养上清中的IL-1β浓度也明显增高(P<0.01)。白术黄芪汤乙酸乙酯提取物作用后,NLRP3,caspase-1,IL-1β表达均明显下降(P<0.05)。结论:白术黄芪汤乙酸乙酯提取物对LPS刺激的巨噬细胞NLRP3炎症小体有抑制作用。