应用iTRAQ技术联合PRM验证技术筛选肝硬化患者急性肾损伤的早期预测生物标志物

摘要

目的 筛选肝硬化并发急性肾损伤(AKI)的早期预测新型生物标志物.方法 前瞻性入组肝硬化患者90例,收集患者出现AKI高危因素后第1天尿液,并检测高危因素出现前及出现后第1、2天血肌酐(Scr)水平.应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术联合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术筛选出肝硬化并发AKI患者(AKI组)与未发生AKI患者(对照组)尿液中差异蛋白.根据丰度水平,从差异蛋白中选择靶蛋白作为早期预测肝硬化并发AKI的潜在新型生物标志物,并用平行反应监测(PRM)技术进一步验证其表达情况.结果 11例肝硬化发生AKI.AKI组与对照组在高危因素出现后第1天尿液中共筛选出289个差异蛋白,其中上调蛋白64个,下调蛋白225个.在上调的差异蛋白中,AKI组谷氧还蛋白-1(GRXl)与S100钙结合蛋白A7 (S100A7)在高危因素出现后第1天分别升高至对照组的1.76倍及1.51倍,早于Scr变化.PRM技术验证结果显示,AKI组GRX1与S100A7水平分别升高至对照组的2.51及2.17倍.结论 尿蛋白GRX1与S100A7可能是肝硬化患者并发AKI的早期预测新型生物标志物.