牛膝总皂苷体外干预膝关节炎软骨细胞增殖与凋亡的研究

摘要

目的 观察不同浓度牛膝总皂苷对人膝骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 实验分为空白组、牛膝总皂苷0.01 mg/mL组、牛膝总皂苷0.05 mg/mL组、牛膝总皂苷0.1 mg/mL组、牛膝总皂苷0.5 mg/mL组、牛膝总皂苷1 mg/mL组.取第3代人膝骨关节炎软骨细胞,空白组常规培养,牛膝总皂苷各组加入相应浓度牛膝总皂苷D/F12培养,采用CCK-8法及An-nexin V-FITC/PI检测细胞增殖和凋亡情况,应用放射免疫分析法检测IL-1β水平,应用ELISA法检测TNF-α水平.结果 牛膝总皂苷各组培养第3天细胞增殖达到高峰(空白组第5天达到高峰),之后呈下降趋势,牛膝总皂苷0.5 mg/mL组各时间点细胞增殖OD值均明显高于其他组(P均0.05);牛膝总皂苷0.1 mg/mL、0.5 mg/mL、1 mg/mL组早期和晚期细胞凋亡率及总凋亡率均明显低于空白组(P均<0.05),且牛膝总皂苷0.5 mg/mL组细胞总凋亡率明显低于牛膝总皂苷0.1 mg/mL和1 mg/mL组(P均<0.05).干预72 h,牛膝总皂苷各组IL-1β、TNF-α水平均明显低于空白组(P均<0.05),且牛膝总皂苷浓度越高,IL-1β、TNF-α水平越低,各组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 牛膝总皂苷体外能有效促进人膝骨关节炎软骨细胞增殖,抑制软骨细胞凋亡及软骨细胞中IL-1β、TNF-α的表达.