山羊传染性胸膜肺炎荧光定量PCR检测方法的初步建立

摘要

为实现山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)快速检测,研究基于病原体山羊支原体山羊肺炎亚种的16S rRNA基因,设计合成特异性引物及探针,采用5’FAM-TAMRA3’标记物进行标记。结果显示,试验建立的CCPP-16S实时荧光定量PCR方法可特异性检测CCPP,产生特异性荧光信号,对相关其他病菌无法检出荧光信号;以CCPP-16S载体质粒为标准品,构建荧光标准曲线,探针的检测敏感度可达10^(2.06)copies/μL DNA。研究表明,试验建立的实时荧光定量PCR方法可快速特异性检测CCPP,有待临床实践应用验证。