紫河车饮片干浸膏粉及配方颗粒的位点特异性PCR鉴别

摘要

目的:紫河车在我国有悠久的药用历史,《中华人民共和国药典》自2015年版起不再收录紫河车及其中药成方制剂,但市场上仍有紫河车饮片及含紫河车的产品,并存在使用猪、牛、羊等动物胎盘伪充紫河车入药的现象。建立一种适用于紫河车饮片、干浸膏粉及配方颗粒的特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴定方法。方法:根据紫河车COⅠ基因序列筛选适用于紫河车饮片、干浸膏粉及配方颗粒的稳定引物区间,并在区间内筛选获得紫河车及其混伪品的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,设计特异性鉴别引物,优化反应体系,并对此方法进行耐受性及适用性考察。结果:当退火温度为60℃,循环数为33次时,紫河车正品饮片、干浸膏粉及配方颗粒均能扩增出约110 bp片段,其他3种伪品及阴性对照均无条带。结论:建立的特异性PCR鉴别方法可准确地鉴别紫河车及相关产品真伪。