一种基于Red的在大肠杆菌中修饰染色体和BAC的新型重组工程系统

摘要

近 5年来兴起了一种新型的基于λ 噬菌体Red重组系统的重组工程技术 ,它将缺陷型λ 噬菌体整合入大肠杆菌染色体上 ,使 3种重组酶蛋白Exo、Beta和Gam的表达受到严格的调控。Red重组工程技术不受酶切位点的限制 ,只需用 35～ 5 0bp长的同源臂就能得到很高的重组效率。运用这种技术能在大肠杆菌体内通过同源重组对大肠杆菌染色体、BAC质粒等复杂DNA片段上的基因进行突变、敲除、替换等修饰 ;此外可运用该技术中缺口修复的方法构建质粒。Red重组工程技术有远大的应用前景 ,将极大地推动功能基因组研究的进展。