D2-43病毒E蛋白在酵母细胞表面的展示

摘要

目的 :在酵母细胞表面展示登革 2型病毒 4 3株 （D24 3）的E基因 ,探索利用酵母表面展示系统建立DNA改组筛选平台的可行性。方法 :通过RTPCR扩增获得D24 3的E基因 ,将该基因亚克隆至T载体后 ,再克隆至酵母表面展示载体pYD1,于酿酒酵母EBY10 0中利用半乳糖进行诱导表达。表达产物采用间接免疫荧光法和FACS进行检测。结果 :酵母表面展示产物可与D24 3的腹水抗体特异性地结合 ;在半乳糖诱导后 2 4h ,展示E蛋白的酵母细胞百分数达 2 2 .0 7%。结论 :本研究为建立基于酵母表面展示系统的DNA改组筛选平台奠定了基础。