油田采出水石油烃降解菌分离、鉴定及高通量选育复合诱变菌株

摘要

[目的]为解决石油烃类物质(Total petroleum hydrocarbons,TPHs)引起的环境污染问题,提高野生型菌株对TPHs的降解率.[方法]基于微生物修复技术,通过富集培养、初筛和复筛从油田采出水中分离TPHs优势降解菌株,经形态学、生理生化以及16S rRNA基因序列分析确定其种属.采用紫外线与等离子体复合诱变技术,以96孔板发酵法替代摇瓶培养发酵,采用以多功能酶标仪双波长紫外光谱法测定为基础的高通量筛选方法选育TPHs高效降解菌株,并通过方差分析检验突变株的遗传稳定性.[结果]经鉴定,分离自采出水的野生型菌株PW04为多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium multivorum).通过复合诱变获得了3株能够高效降解TPHs的突变菌株:S.multivorum PW04-H10、S.multivorum PW04-G9、S.multivorum PW04-A6,降解率分别为85.1％、82.7％、82.9％.遗传稳定性分析结果表明这3株菌遗传性能均稳定.[结论]经分离、诱变选育出的TPHs高效降解菌株其降解率最高达85.1％,与野生型菌株相比提高了48％,可显著降低环境中TPHs含量,有效修复原油污染环境.