异种移植模型中血小板源生长因子改善人卵巢组织移植物微循环重建研究

摘要

目的 通过运用前期研究提出新型卵巢组织玻璃化冷冻方法,改善了卵巢组织间质和微血管存活状况,在前期研究基础上,时卵巢组织冷冻带来的间质损伤在冻融后进行体外培养修复,培养中通过添加血小板源生长因子(PDGF)改善移植后血管重建过程.方法 对3例患者的卵巢组织皮质片进行深低温保存.将3例其24片卵巢组织片配对分为PDGF干预组和对照组,每组各12片组织,通过体外短期培养24小时并在培养期间在PDGF组添加100ng/tl的PDGF作为干预,观测培养前后卵巢组织体外生长趋势.将两组卵巢组织移植到SCID小鼠皮下,两周后将皮下组织取出,观测组织血管重建情况,比较各组微血管密度计数以及组织生长活性及凋亡情况.结果 在异种移植模型中通过免疫组织化学法检测卵巢新生微血管提示,添加PDGF因子培养后的卵巢组织移植物新生微血管密度计数显著高于普通培养条件下的卵巢组织移植物.同时采用免疫荧光方法原位检测组织凋亡(TUNEL)情况表明添加PDGF因子培养后的卵巢组织移植物凋亡细胞比例与对照组相比显著降低.结论 我们首次在卵巢组织体外培养过程中短期添加PDGF促进卵巢血管生成.在异种移植模型中,我们发现添加PDGF因子的移植物微循环重建情况显著改善,并且移植物凋亡情况与对照组显著降低.以上结果为优化卵巢组织体外培养以及移植物微循环重建效果提供了新思路.