用显微注射方法分析牙鲆肌肉发育调节基因MyoD,Myf5的启动子序列

摘要

克隆了牙鲆(Paralichthys olivaceus)肌肉发育调节基因MyoD 和 Myf5的启动子序列,分别为608 bp和1 073 bp.对序列进行分析发现MyoD 和 Myf5的启动子含有参与肌肉发育调控的基因的结合位点.将MyoD 和 Myf5的启动子连接到GFP载体上,构建了重组质粒MyoDP-GFP 和 Myf5P-GFP,并注射到一细胞或两细胞的斑马鱼胚胎中,对这两个基因的启动子进行了瞬时表达研究.结果表明,牙鲆MyoD 和 Myf5的启动子可以驱动绿色荧光蛋白特异地在斑马鱼肌肉纤维中表达,因此牙鲆608 bp MyoD和1 073 bp Myf5的启动子包含着可以驱动MyoD和Myf5正常表达的必需元件,它们是肌肉特异的,并且可以跨物种行使其功能.