乳腺癌循环肿瘤细胞分离鉴定试剂盒的建立

摘要

目的 探讨乳腺癌循环肿瘤细胞(CTC)分离鉴定试剂盒中上皮细胞黏附分子(EpCAM)免疫脂质磁球及人乳腺珠蛋白(hMAM)单克隆抗体在乳腺癌CTC分离鉴定中的应用价值.方法 将乳腺癌MCF-7细胞混于健康志愿者的新鲜血样中,采用免疫磁球分离技术分析EpCAM免疫脂质磁球对乳腺癌细胞的分离效果.在强生CellTracks(R) AutoPrep(R) CTC检测仪(简称强生CellsearchTM系统)上进行EpCAM免疫脂质磁球和强生磁球对MCF-7细胞捕获效率的模拟实验及乳腺癌患者血液的临床检测.结果 荧光显微镜的观察结果显示EpCAM免疫脂质磁球的细胞捕获能力明显强于无抗体修饰的纳米磁球.激光共聚焦显微镜的观察结果显示EpCAM抗体修饰可显著增强磁球捕获MCF-7细胞的效率和特异性.模拟实验结果显示EpCAM免疫脂质磁球对10、20、40、80、150、200个MCF-7细胞的捕获结果与强生磁球接近;对乳腺癌患者血液中的CTC捕获效率与强生磁球相当,部分病例要明显优于强生磁球.结论 构建的基于EpCAM免疫脂质磁球和hMAM单克隆抗体的CTC分离鉴定试剂盒对乳腺癌患者血液中的CTC具有较高的捕获效率,这将为实现乳腺癌早期诊断、术前、术后分析及治疗效果检测提供了有力的支撑.