基于JAK/STAT信号通路探讨连花清瘟颗粒对甲型H1N1流感病毒性肺炎小鼠肺组织的保护作用及机制

摘要

目的基于Janus激酶(JAK)/信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路,探讨连花清瘟颗粒对甲型H1N1流感病毒性肺炎小鼠肺组织的保护效果及机制。方法使用不同稀释倍数的甲型H1N1流感病毒液感染BALB/c小鼠,观察小鼠存活率及肺水肿严重程度,从而确定造模病毒稀释倍数。设置模型组(H1N1组)、连花清瘟颗粒组(LC组)及对照组,各10只。LC组予连花清瘟颗粒(5 g/kg)溶液灌胃5 d后,滴鼻感染甲型H1N1流感病毒,然后持续给药干预5 d;H1N1组滴鼻感染甲型H1N1流感病毒,对照组用与造模病毒液同体积的生理盐水滴鼻;在LC组给药的同时,H1N1组与对照组均用同体积生理盐水灌胃。观察各组小鼠健康状态,采用实时荧光定量PCR检测小鼠肺组织JAK1、STAT3 mRNA表达水平,观察肺组织病理学变化,采用Western blot检测小鼠肺组织JAK1、STAT3蛋白表达水平,采用ELISA检测小鼠血清IgG水平。结果确定使用稀释倍数为100的病毒液进行造模。与对照组比较,H1N1组、LC组JAK1、STAT3 mRNA表达水平明显升高,而相较于H1N1组,LC组JAK1、STAT3 mRNA表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组小鼠肺组织正常;H1N1组小鼠肺组织出现充血、水肿现象,同时发生弥漫性炎症细胞浸润,伴有上皮细胞脱落、坏死,发现支气管上皮细胞变形;LC组小鼠相较H1N1组小鼠肺组织水肿、充血现象减轻,炎症细胞浸润明显减少,肺部病变得到缓解。与对照组比较,H1N1组小鼠肺组织JAK1、STAT3蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。H1N1组小鼠血清IgG水平明显高于对照组,LC组小鼠血清IgG水平明显高于对照组、H1N1组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论连花清瘟颗粒可以抑制甲型H1N1流感病毒性肺炎小鼠体内JAK/STAT信号通路,增强小鼠免疫力,减少小鼠肺组织损伤。