液相芯片技术检测马立克氏病病毒方法的建立

摘要

目的 建立检测马立克氏病病毒的双抗夹心液相芯片技术方法.方法 将捕获抗体偶联到19号微球,分别确定捕获抗体的偶联量、检测抗体和SA-PE抗体的工作浓度,用建立的液相芯片方法进行特异性、灵敏度、重复性及临床样品的分析.结果 1×106个荧光编码微球的抗体偶联量为2 μg,最佳的检测抗体与SA-PE的工作浓度分别为2 μg/mL和4μg/mL.该方法特异性强,只检出马立克氏病病毒,其他病毒未检出;灵敏度为125 pfu/mL;批内批间的变异系数分别为0.85％和2.4％;对58份临床样品检出率为31％.与PCR方法比较,符合率为94.8％.结论 建立的马立克氏病病毒液相芯片检测方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点.该方法可用于马立克氏病的监测,也可用于SPF鸡的筛选.