兔胚胎干细胞的早期培养条件初步研究

摘要

目的 探索小鼠胚胎内胚层细胞和鸡胚提取物(CEE)对兔胚胎干细胞早期培养的影响.方法 用全新的方法对兔胚胎干细胞的建系条件进行探讨.将分离到的囊胚期内细胞团接种到丝裂霉素C灭活的小鼠胚胎内胚层细胞饲养层和几种不同的培养液构成的培养体系中,观察内细胞团的贴壁和生长状况,并对由内细胞团生长出的具有胚胎干细胞形态的细胞集落进行传代.结果 以灭活的小鼠胚胎内胚层细胞作为饲养层,以78%D-MEM/F-12+20%Knockout SR+2 mmol/LL-Glutamine+1%MEMNAA+0.1mmol/L β-mercaptoethanol+8ng/ml hrbFGF+2%CEE做培养液,兔内细胞团可以很好的贴壁,生长成具有标准的胚胎干细胞(ESC)形态的细胞集落.结论 小鼠内胚层细胞和CEE联合使用可以很好的支持原代兔胚胎干细胞(RESC)的生长,小鼠内胚层细胞和CEE中可能含有某些抑制RESC分化的因子.