舒尼替尼联合多西他赛对A549细胞增殖、凋亡、细胞周期及c-met、mek、erk mRNA表达的影响

摘要

目的:探讨舒尼替尼单药以及联合多西他赛不同顺序给药对A549细胞增殖、凋亡、细胞周期及c-met、mek、erkmRNA表达的影响。方法:取对数生长期的A549细胞进行以下实验。实验Ⅰ:对照组加入RPMI1640培养基;多西他赛单药组给予多西他赛(终质量浓度16mg/L,下同);舒尼替尼单药组给予舒尼替尼(终浓度7.5μmol/L,下同);舒尼替尼+多西他赛组,加入同时含两药的培养液。实验Ⅱ:多西他赛→舒尼替尼组(D→S组)先加入100μL含多西他赛的培养液培养24h,洗脱,再加入100μL含舒尼替尼的培养液继续培养24h;舒尼替尼→多西他赛组(S→D组),同上反向处理。采用MTT法检测以上各组细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡,RT-PCR检测A549细胞c-met、mek、erkmRNA的表达水平。结果:Ⅰ:联合用药组较单独用药组细胞增殖抑制率、晚期凋亡率和总凋亡率升高,S期细胞减少,erk表达上调(P<0.05)。Ⅱ:D→S组较S→D组细胞增殖抑制率和凋亡率升高,G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增多,c-met、mekmRNA表达下调,erkmRNA表达上调(P<0.05)。结论:舒尼替尼和多西他赛均能抑制A549细胞的生长,联合用药优于单独用药;多西他赛后序贯舒尼替尼能产生明显的协同效应,效果优于舒尼替尼后序贯多西他赛。