杜氏盐藻过氧化物酶1酵母双杂交诱饵质粒的构建

摘要

目的:构建杜氏盐藻过氧化物酶1(DsPrdx1)的酵母双杂交诱饵质粒并检测其对酵母细胞有无自激活及毒害作用。方法:PCR扩增DsPrdx1的开放阅读框,将扩增出的基因片段插入酵母表达质粒pGBKT7中构建诱饵质粒。经酶切鉴定正确后,用PEG/LiAc法将构建的诱饵质粒分别转化到酵母菌株Y187和AH109中,检测诱饵蛋白对酵母菌有无自激活和毒性作用。结果与结论:构建的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-Prdx1对Y187和AH109既无自激活又无毒害作用,可用于酵母双杂交系统。