氯化锂对经血源性间充质干细胞增殖和神经分化的影响

摘要

目的:探讨Wnt/β-catenin通路激活剂氯化锂(Li Cl)对经血源性间充质干细胞(MMCs)增殖和神经分化的影响。方法:CCK-8法检测不同浓度(0、4、10、20、40 mmol/L)Li Cl作用4 d对MMCs增殖的影响,采用半定量PCR和Western blot法检测4 mmol/L Li Cl对MMCs中β-catenin表达的影响;采用免疫细胞化学检测对照组、诱导分化组(DMSO和β-ME联合诱导分化)和4 mmol/L Li Cl诱导组细胞中NF和NSE阳性细胞率,采用半定量PCR检测NF和NSE在转录水平的表达。结果:低浓度(4、10 mmol/L)Li Cl促进MMCs增殖,高浓度(20、40 mmol/L)Li Cl抑制MMCs增殖。与对照组相比,4 mmol/L Li Cl处理可增加β-catenin蛋白的表达水平(t=64.500,P<0.001),而mRNA的表达水平无明显变化(t=1.606,P=0.183)。诱导分化组细胞中NF和NSE mRNA的表达水平及蛋白的阳性表达率升高(P<0.05);与诱导分化组相比,4 mmol/L Li Cl诱导组NF和NSE mRNA的表达水平及蛋白的阳性表达率降低(P<0.05)。结论:4 mmol/L Li Cl可通过增强β-catenin蛋白的表达激活Wnt/β-catenin信号通路,促进MMCs的增殖;而在诱导分化过程中,Li Cl通过抑制NF和NSE在转录和蛋白水平的表达抑制MMCs向神经元分化。