淫羊藿素通过CXCR4/SDF-1信号通路促进小鼠成骨细胞成熟和矿化

摘要

目的:研究淫羊藿素是否通过CXC趋化因子受体4(CXCR4)/基质细胞衍生因子1(SDF-1)信号通路促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1成熟和矿化。方法:将体外培养的MC3T3-E1细胞分为空白对照组、AMD3100组、淫羊藿素组、淫羊藿素加AMD3100组。药物处理24 h时,采用实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测CXCR4、SDF-1和成骨相关基因和蛋白的表达;药物处理3、6 d时,采用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP的活性;药物处理14 d时,采用茜素红染色法检测钙化结节。结果:实时定量RT-PCR检测结果显示,与空白对照组比较,淫羊藿素组CXCR4、SDF-1、Runx2和OPG基因表达量增加(P<0.05或P<0.01),而加入CXCR4拮抗剂AMD3100后,CXCR4基因相对表达量减少(P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,与空白对照组比较,淫羊藿素组CXCR4、SDF-1、Runx2和OPG蛋白的相对表达量增加(均P<0.01),而加入AMD3100后,CXCR4、SDF-1、Runx2和OPG蛋白表达量减少(均P<0.01)。药物处理第3天和第6天时,淫羊藿素组ALP活性明显高于空白对照组(均P<0.01),而加入AMD3100后ALP活性显著降低(均P<0.01)。药物处理14 d时,与空白对照组比较,淫羊藿素组茜素红染色面积增加,而加入AMD3100后茜素红染色面积明显减少。结论:淫羊藿素可能通过CXCR4/SDF-1信号通路促进小鼠成骨细胞成熟及矿化。