真菌毒素降解酶在大肠杆菌中的表达及活性分析

摘要

为了使一种真菌毒素降解酶能够同时高效降解玉米赤霉烯酮(Zearaleonoe,ZEN)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)两种真菌毒素,将改造过的基因pETDuet-1-101(玉米赤霉烯酮降解酶基因)-201(脱氧雪腐镰刀菌烯醇降解酶基因)导入BL21受体细胞,使基因pETDuet-1-101-201能够在Trans5α受体细胞中克隆、在BL21受体细胞中表达,构建共表达质粒1个及表达菌株1株。PCR扩增获得目的片段并连入pETDuet-1载体质粒,转化Trans5α富集菌株,经菌落PCR验证阳性片段,培养正确菌株,再转化BL21表达型感受态,培养菌株经IPTG诱导。结果表明:DON的降解率为51.6%,ZEN的降解率为26.7%,证明菌株的蛋白表达对ZEN和DON毒素都有较好的降解能力。