陆地棉体细胞胚胎的发生和遗传转化条件初探

摘要

以陆地棉 (冀棉 2 0 )下胚轴为外植体 ,在含 KT0 .3 mg/ L和 2 ,4-D0 .0 8mg/ L的 MS培养基上 ,诱导产生了胚性愈伤组织 .继代培养不需要添加激素 ,胚性愈伤组织即可分化为胚状体 ,并萌发出小芽 .胚状体萌发过程与合子胚相似 ,但出现了一些畸形胚 .解剖学方法观察发现 ,这些畸形胚的维管束系统不明显或形态异常 .以农杆菌介导法对冀棉 2 0胚状体及胚性愈伤组织进行了雪花莲凝集素 (GNA)基因的遗传转化条件探索 ,并以GUS基域瞬间表达检测加以证实 ,得出农杆菌的浓度为 O.D60 0 =0 .8时 ,浸染时间为 5 min,共培养时间为 3d,筛选培养基中卡那霉素浓度为 75 mg/ L,对冀棉 2 0胚状体及胚性愈伤组织转化是较为合适的 .