N-乙酰半胱氨酸对香烟烟雾提取物诱导的气道上皮细胞线粒体过氧化损伤的保护作用

摘要

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导的气道上皮细胞线粒体损伤的保护作用及机制.方法 体外培养人气道上皮细胞BEAS-2B,分为正常对照组、7.5％(75 mL/L)CSE组、7.5％CSE+NAC组,干预24 h后应用MTT法检测细胞活性,荧光显微镜下观察线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)强度,流式细胞仪检测MMP水平,Western blotting检测细胞内Sirt3和锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)的蛋白表达,比色法测定细胞内MnSOD活性.结果 7.5％CSE+NAC组的气道上皮细胞活性较7.5％CSE组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05).荧光显微镜和流式细胞仪检测结果显示,7.5％CSE+NAC组的气道上皮细胞MMP水平显著高于7.5％CSE组(P<0.05).与7.5％CSE组相比,7.5％CSE+NAC组气道上皮细胞线粒体内ROS显著降低,Sirt3和MnSOD蛋白表达以及MnSOD活性均显著增加(P<0.05).结论 NAC通过调控Sirt3-MnSOD信号通路减轻CSE所致的气道上皮细胞线粒体过氧化损伤,有助于阐明NAC对慢性阻塞性肺疾病的作用机制.