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全身照射小鼠模型肠道通透性HPLC-ELSD检测方法的建立

         

摘要

目的:建立评价全身照射(total body irradiation,TBI)实验小鼠模型肠黏膜通透性双糖吸收试验的高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测方法。方法:TBI实验小鼠模型和正常小鼠各8只,采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器分析(HPLC-ELSD)检测尿液标本中乳果糖(lactulose,L)和甘露醇(mannitol,M)的排出率比值,评价两组小鼠的肠道黏膜通透性。结果:尿液中甘露醇和乳果糖浓度分别在0.5~6 mg/mL和0.25~3 mg/mL范围内线性关系良好,本方法测定甘露醇和乳果糖的最低检测极限分别为500 ng和为250 ng。甘露醇和乳果糖的加样回收率分别为86.5%~109.2%和86.3%~114.4%。甘露醇和乳果糖排出量的平均日内变异系数分别为0.86%和1.13%(n=6);平均日间变异系数分别为1.11%和1.39%(n=6)。TBI组小鼠肠道通透性(乳果糖/甘露醇比值:0.5108±0.03266)显著高于正常组小鼠(0.2908±0.05332)。结论:HPLC-ELSD检测肠道通透性具有简便、专一灵敏、重复性好、准确可靠等特点,可用于TBI小鼠肠道黏膜通透性的测定和监测。

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