利用饲养细胞体外扩增高纯度的效应NK细胞

摘要

目的比较两类饲养细胞(FC)体外扩增自然杀伤(NK)细胞的效果,鉴定出特定的NK细胞群并进行功能性分析,从而确定最优的FC。方法构建两类FC,分别是第1代FC(FC-000,K562-41BBL)和第2代FC(FC-002,K562-41BBL-mbIL15-mbIL21),分别与人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)共培养14 d,收获细胞,流式细胞术鉴定NK细胞表型,利用实时无标记细胞分析仪检测两类NK细胞对A549肿瘤细胞的杀伤能力。结果培养14 d后,FC-002扩增的NK细胞纯度(93. 5%)高于FC-000扩增的NK细胞(70. 2%)(P<0. 05); FC-002扩增的NK细胞增殖倍数(3 325)高于FC-000扩增的NK细胞增殖倍数(10)(P<0. 05)。两者均促进了具有NKG2D、NKp44、CD69功能性受体的NK细胞群增殖,且FC-002扩增的NK细胞具有更高的肿瘤杀伤能力及干扰素-γ表达能力(P<0. 05)。结论利用FC能够在体外有效地扩增高纯度的NK细胞,并能够选择性扩增具有NKG2D、NKp44、CD69功能性受体的NK细胞群,且第2代FC所扩增的NK细胞对于肿瘤细胞具有更强的杀伤能力,并在NK细胞增殖倍数、纯度上均优于第1代FC。