HePTP抑制BCR诱导的未成熟B淋巴细胞的凋亡

摘要

目的研究血细胞专有的酪氨酸磷酸酶(hematopoietic protein tyrosine phosphatase,HePTP)在B细胞凋亡研究模型[B细胞表面抗原受体(B-cell antigen receptor,BCR)诱导的WEHI231细胞的凋亡]中的作用及机制。方法HePTP是BCR诱导WEHI231细胞发生凋亡的信号传导通路中ERK和p38激酶的调节因子。应用PCR定点突变的方法,构建起含有功能性突变的HePTP基因的逆转录病毒载体。将野生型与突变型质粒转染BOSC23细胞,收集病毒上清,感染WEHI231细胞后,加入anti-IgM诱导凋亡,流式细胞仪检测被感染细胞的凋亡情况。western印迹检测野生型及突变型HePTP的表达及作用。结果野生型HePTP基因的过量表达抑制WEHI231细胞的凋亡,而失去与底物作用位点及催化域失活的突变型基因的过量表达则均没有抑制凋亡的作用。结论HePTP抑制BCR诱导的未成熟B淋巴细胞的凋亡,与MAPK底物结合,并同时使其磷酸化的水平发生变化,是HePTP发挥抗凋亡作用的两个必要条件。