利福平抑制地塞米松诱导骨髓间充质干细胞成脂分化的机制研究

摘要

目的明确利福平对糖皮质激素诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stroma cell,BMSC)成脂分化的作用。方法体外培养Sprague-Dawley大鼠BMSC并随机分为4组:5μg/ml利福平+10^(-6)mol/L地塞米松(A),PBS+10^(-6)mol/L地塞米松(B),5μg/ml利福平(C)和PBS(D)。分别应用罗丹明123结合流式细胞仪方法和酶联免疫吸附法检测5μg/ml利福平对BMSC的P糖蛋白活性和胞内地塞米松蓄积浓度影响。各组孵育14 d后,分别进行油红O染色和碱性磷酸酶染色,定量检测三酰甘油含量、碱性磷酸酶活力、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA和Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA表达。结果利福平减少BMSC胞内罗丹明123强度和胞内地塞米松蓄积量(P<0.01)。B组诱导BMSC成脂分化、PPARγmRNA表达增加和三酰甘油含量升高。A组、C组和D组BMSC未发生成脂分化,PPARγmRNA表达增加和三酰甘油含量无统计学差异。A组BM SC碱性磷酸酶活性和Runx2 mRNA表达最强(P<0.01),B组碱性磷酸酶活性和Runx2 mRNA表达下降(P<0.01)。结论利福平上调BM SC的P糖蛋白活性,抑制糖皮质激素诱导的成脂分化。