奥拉帕利联合GANT61对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的探讨胶质瘤相关癌基因同源物(glioma-associated oncogene homolog 1,GLI1)抑制剂GANT61,聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly-ADP Ribose polymerase,PARP)抑制剂奥拉帕利(olaparib)以及olaparib联合GANT61对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法通过Western印迹法检测正常卵巢上皮组织和上皮性卵巢癌组织中GLI1的表达情况以及正常卵巢上皮细胞(IOSE-80)和卵巢癌细胞系(SKOV3、ES2、HEY、A2780)中GLI1的表达水平。选取高表达GLI1的卵巢癌细胞系进行实验,设置实验分组:对照组、GANT61组、olaparib组和olaparib联合GANT61组。通过CCK8法、平板克隆实验、EDU实验检测各处理组细胞增殖情况。通过流式细胞术检测各处理组细胞中Annexin V+/7AAD+细胞比例。通过Western印迹法以及免疫荧光分别检测DNA损伤标志物γ-H2AX的表达水平和灶点形成情况。结果与正常上皮性卵巢组织相比,GLI1在上皮性卵巢癌组织中显著高表达(P<0.001);与IOSE-80正常卵巢上皮细胞相比,卵巢癌细胞中GLI1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。CCK8、平板克隆实验、EdU实验以及流式细胞术结果表明,相较于对照组,GANT61组和olaparib组细胞抑制率和凋亡率均增高(P<0.05),且联合组较olaparib组细胞抑制率和凋亡率增高(P<0.05)。免疫荧光和Western印迹法的结果表明,相较于对照组,GANT61组和olaparib组细胞γ-H2AX的灶点数量与蛋白表达水平显著升高(P<0.05),且联合组较olaparib组细胞γ-H2AX的灶点数量与蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论olaparib联合GANT61能够显著诱导卵巢癌细胞DNA损伤、抑制细胞增殖以及诱导细胞凋亡。