重新去极化对小脑颗粒神经元c-Jun的影响

摘要

【目的】观察重新去极化 (redepolarization ,2 5mmol/LK+ )对原代培养的大鼠小脑颗粒神经元蛋白质c Jun的影响 ,对去极化挽救神经元过程中c Jun的作用及其调节机制进行初步探讨。【方法】用Westernblotting检测原代培养的大鼠小脑颗粒神经元胞内c Jun总量及磷酸化水平 ;用逆转录 聚合酶链反应 (reversetranscription polymerasechainreaction ,RT PCR)检测编码基因c jun表达水平 ;用免疫共沉淀 (coimmunoprecipitation)检测c Jun氨基末端激酶 (c JunN terminalkinase ,JNK)活性 ;用二乙酸荧光素 (fluoresceindiacetate ,FDA)染色检测神经元存活率。【结果】复极化 (repolarization ,5mmol/LK+ )使小脑颗粒神经元的c junmRNA、c Jun总量及磷酸化水平迅速增加 ,神经元存活率随后明显下降 ;复极化 2h后重新去极化 ,c junmRNA、c Jun总量及磷酸化在 2h内恢复至正常水平 ,而神经元存活率维持在正常水平 ;JNK活性在极化转换前后未改变。【结论】c Jun的抑制可能介导了重新去极化挽救小脑颗粒神经元的作用 。