泛素水解酶22siRNA对宫颈癌CD133^+宫颈癌干细胞增殖和侵袭的影响

摘要

【目的】采用USP22 si RNA对宫颈癌CD133+Ca Ski宫颈癌干细胞进行基因治疗,观察其对USP22含量和对增殖侵袭能力的影响,并对其分子生物学机制进行初步探讨。【方法】流式分选获得CD133+Ca Ski宫颈癌干细胞,分为USP22组、阴性对照(NC)组、空白对照组(MOCK)组。采用western blot法比较各组细胞USP22蛋白的含量,MTT法检测3组细胞的增殖能力,Transwell法检测3组细胞的侵袭能力,荧光素酶报告基因实验检测3组细胞Wnt/β-catenin信号通路的活性。【结果】采用流式细胞术分选CD133阳性细胞后Ca Ski细胞CDl33阳性率为(96.87±5.31)%,显示流式分选宫颈癌干细胞成功(P<0.05)。Western blot检测结果显示,USP22组CD133+Ca Ski细胞中USP22蛋白表达量明显降低。MTT结果显示USP22组细胞增殖能力明显减弱,差异具有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验结果显示USP22组CD133+Ca Ski细胞侵袭能力明显受到抑制,差异具有统计学意义(P<0.05)。荧光素酶报告基因实验结果显示,USP22组Wnt/β-catenin信号通路的转录活性明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】USP22 si RNA有降低CD133+Ca Ski宫颈癌干细胞内Wnt/β-catenin信号通路活性的作用,进而可以实现对宫颈癌干细胞增殖和侵袭功能的抑制,该治疗方法有望成为宫颈癌基因治疗的新手段。