多棘蜈蚣钙通道毒素多肽CaTX-Ssmd1原核表达及功能鉴定

摘要

为了检测广西多棘蜈蚣毒腺转录组文库新基因CaTX-Ssmd1编码的多肽是否具有阻断钙离子通道蛋白的生物活性,将构建的pGEX-4T-1-CaTX-Ssmd1原核表达载体转化Escherichia coli Rosetta(DE3),诱导表达产物经酶切和RP-HPLC分离后得到CaTX-Ssmd1成熟多肽.质谱检测显示CaTX-Ssmd1多肽分子量与理论值一致;钙成像实验表明CaTX-Ssmd1多肽能有效减弱高钾外液灌流激发的小鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)细胞[Ca^(2+)]i信号.结论:初步验证了原核表达纯化的CaTX-Ssmd1多肽为新发现的电压门控性钙通道(voltage gated calcium channels,VGCC)阻断剂,丰富了多棘蜈蚣生物活性多肽资源库.