一种快速微量的非放射性核糖体失活蛋白活性检测方法

摘要

建立了一种非放射性的利用兔网织红细胞裂解液(Rabbit Reticulocyte Lysate)无细胞翻译系统和荧光素酶检测系统(Luciferase Assay System)的核糖体失活蛋白检测方法,快速检测了两种方法提取的麻疯树核糖体失活蛋白(RIPs)Curcin的无细胞蛋白质翻译抑制活性,测得离子交换层析法纯化Curcin的IC50=0.045±0.009 nmol/L,分子筛层析纯化Curcin的IC50=0.217±0.026 nmol/L;该方法避免了放射性同位素的使用,使检测过程简便、快速、安全、准确.同时还对试验条件,包括反应时间、温度,缓冲液pH值、盐浓度等进行了摸索和优化.