赭纤虫eRF1识别终止密码子特异性功能位点分析

摘要

蛋白质翻译终止过程中第一类肽链释放因子（eukaryotic polypeptide release factor,eRF1）识别终止密码子,水解肽酰-tRNA酯键,释放新生肽链,但eRF1识别终止密码子的机制尚不清楚。纤毛虫eRF1识别密码子的特异性为研究该机制提供了理想的材料。分析了赭纤虫（Blepharisma japonicum）eRF1的N端结构域中与密码子识别有关的关键的氨基酸。预测发现赭纤虫和酵母eRF1的一些与密码子识别有关的氨基酸被磷酸化修饰的几率很高,且二者磷酸化修饰的氨基酸位点有所差异。利用点突变方法向赭纤虫eRF1的N端引入与酵母eRF1一致的磷酸化位点时（N23S/D25E/A70S/Q115E）,其识别终止密码子的特异性发生改变,由UAA/UAG识别特异性转变为UAA/UAG/UGA三个密码子全识别。说明这些位点磷酸化可能参与调节eRF1识别终止密码子的功能。