大鼠骨髓间质干细胞的分离培养及生物学特性研究

摘要

目的建立大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)最佳的体外分离培养方法,并研究其基本的生物学特性.方法采用密度梯度离心和贴壁培养两种方法分离大鼠的MSCs,进行形态学观察及增殖生长方面的测定;免疫细胞化学染色鉴定表面标志.结果大鼠MSCs体外培养呈梭形;细胞生长曲线为"S"型;密度梯度离心法原代培养15 d达到80%～90%的融合,而改良的直接贴壁法只需要5 d;细胞周期显示G0/G1期88.29%;免疫细胞化学染色显示CD44表达阳性,CD34、CD45为阴性.结论两种方法均可获得骨髓间质干细胞,但贴壁培养法操作更简便、快速,具有对细胞活性影响较小,更利于其贴壁和增殖的优点.MSCs体外培养条件下生长性状稳定,适于做组织工程的种子细胞.