一组miRNAs在睾丸发育中的表达及miR-125a对精原干细胞发育的调节作用

摘要

目的探究一组精原干细胞(SSCs)中高表达的miRNAs在睾丸不同发育阶段的表达变化及miR-125a对体外培养SSCs增殖和凋亡的调节。方法采用实时荧光定量RT-PCR研究34个miRNAs在睾丸不同发育阶段的表达变化。通过miR-125a过表达和抑制慢病毒颗粒感染体外培养SSCs,利用CCK8实验和Ed U标记及Hoachst 33342、碘化丙啶(PI)双染研究miR-125a对体外培养SSCs增殖和凋亡的影响。最后通过实时荧光定量RT-PCR和Western blotting验证促凋亡基因Bak1是否为miR-125a的靶基因。结果不同miRNAs在睾丸发育过程中具有不同的表达模式。miR-125a能促进体外培养SSCs数目的增加,减少其凋亡的发生。miR-125a过表达能降低体外培养SSCs中Bak1 mRNA和蛋白表达量,而miR-125a的抑制则增加体外培养SSCs中Bak1 mRNA和蛋白的表达量。结论不同miRNAs在睾丸发育中有不同的表达模式;miR-125a能调控SSCs增殖和凋亡,Bak1在SSCs中是miR-125a的靶基因。