美人鱼发光杆菌杀鱼亚种LAMP快速检测方法的建立与应用

摘要

建立了美人鱼发光杆菌杀鱼亚种的环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)。针对IGS2基因保守序列的6个区域设计2对特异引物,利用链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)在恒温65℃下保温40 min。采用钙黄绿素作为显色剂,FTA卡采集病样肝组织中病原菌核酸。结果显示:以IGS2基因建立的LAMP方法能够特异性检测美人鱼发光杆菌杀鱼亚种,检测灵敏度为2.6×102 cfu/mL。针对美人鱼发光杆菌杀鱼亚种IGS2基因建立的LAMP检测方法具有较好的特异性和稳定性,可用于美人鱼发光杆菌杀鱼亚种的野外现场快速检测。