低氧和低氧诱导因子在月经样小鼠模型中对子宫内膜崩解的作用

摘要

目的 探究低氧和低氧诱导因子(HIF1A)在小鼠子宫内膜崩解过程中的表达及作用.方法 构建药理性小鼠月经样模型.根据月经样小鼠给药处理方式不同分为4组:(1)PW-CoCl2-组(n=5):孕酮(P4)维持,不添加二氯化钴(CoCl2);(2)PW-CoCl2+组(n=6):P4维持,CoCl2给药;(3)PW+CoCl2-组(n=5):P4撤退,不添加CoCl2;(4)PW+CoCl2+组(n=6):P4撤退,CoCl2给药.P4撤退后0 h、8 h、12 h、16 h、24 h处死小鼠并收集子宫组织,通过低氧探针和免疫组化检测P4撤退后不同时间点小鼠子宫低氧定位和HIF1A蛋白的表达情况;P4撤退后24 h,观察各组小鼠的子宫大体,HE染色法观察各组小鼠子宫组织形态,免疫组化染色法观察PW+CoCl2-组和PW+CoCl2+组小鼠子宫低氧定位和HIF1A蛋白的表达情况;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测P4撤退后24 h子宫组织细胞质和细胞核中HIF1A的表达情况.结果 免疫组化染色显示,小鼠子宫组织在P4撤退后低氧持续时间为0～24 h,P4撤退12 h和16 h时小鼠子宫低氧探针染色面积占比和HIF1A表达水平均显著高于P4撤退0 h时(P<0.05),低氧探针和HIF1A表达位置有很强的相关性.子宫大体和组织形态学观察显示,P4撤退后24 h,PW-CoCl2-组和PW-CoCl2+组小鼠子宫内膜保持完整,PW+CoCl2-组和PW+CoCl2+组子宫崩解出血.免疫组化染色结果显示,PW+CoCl2+组子宫内膜的低氧染色面积占比和HIF1A核染色细胞百分比均显著高于PW+CoCl2-组(P<0.05).Western blot结果显示,P4撤退后24 h,PW-CoCl2-组子宫组织细胞质HIF1A表达较高,在细胞核中几乎检测不到;与PW-CoCl2-组相比,PW-CoCl2+组细胞质HIF1A的表达显著降低而在细胞核中显著升高(P<0.05),PW+CoCl2-组细胞质HIF1A的表达无显著变化而在细胞核中显著升高(P<0.05),PW+CoCl2+组细胞质、细胞核HIF1A的表达均显著升高(P<0.05).结论 月经期间P4撤退导致子宫内膜崩解.低氧和HIF1A与月经期间子宫内膜崩解有关,但不是必需因素.